Jelentés ASEA: Adatok egy in vitro vizsgálat kapcsolatos termékbiztonság
Elvégzett vizsgálat során a Pacific Northwest National Laboratory (PNNL) *
Cél és Jogi nyilatkozat:
Ezeket az adatokat ki kell venni egy in vitro vizsgálatban végzett tudományos meghatározására bioaktivitását ASEA szóló
eukarióta sejteket egy ellenőrzött környezetben. Ez a jelentés nyújt az eredmények összefoglalását kapcsolatos
biztonságossági adatok ASEA a sejtek szintjén. Ez az adat megválaszolja a kérdést: "Van-e bizonyíték arra, hogy mérgező
Asea választ, ha érintkezésbe kerül eukarióta sejtekben? "
Magyarázata transzkripciós faktor - aktiválás tudomány :
Amikor egy sejt által hangsúlyozta egy toxin , a sejt küldésével válaszol egy bizonyos sor transzkripciós faktoroka sejtmagba .
Miután a sejtmag belsejében , ezek a transzkripciós faktorok aktiválásához felelős gének celluláris védelmi és toxinok elleni védelem(például a gyulladásos válasz) . A transzlokációja egyes transzkripciós faktorok a sejtmagba látható fluoreszcens mikroszkóp alatt , amikor a sejtek
Ha a cella megy keresztül toxikus választ, a fluoreszcens festék van húzva a sejtmagba együtt a transzkripciós faktor. Ebben a kísérletben két transzkripciós faktorok , a p65 alegység az NF -KB és a P-Június követték nyomon . Ez a két transzkripciós faktor ismert, hogy aktiválni kell minden toxikus válaszokat.
A fényképeket a fluoreszcens mikroszkópos képek a sejtek egy toxikus válasz , ha regisztrált a zöld festék látható, hogy mozog a sejtmagba .
Az eljárás :
A megcélzott eukarióta sejteket tenyésztjük kitett ételek és rendre (1 ) Foszfát
Pufferelt sóoldat (PBS ) - a negatív kontroll (nincs toxikus válasz várható) , (2) 5 % - ASEA Egyenértékű
az 5 %-a a tápoldat (vér plazma) a ASEA , ( 3) 20 % - ASEA Egyenértékű cseréje
20%-a a tápoldat ASEA , és (4 ) Egy ismert toxin - a pozitív kontroll ( a toxikus reakciók várható) .
A válasz a transzkripciós faktorok , a p65 alegység az NF -KB és a P- Jun, voltak fényképezett mikroszkóp alatt az expozíció után a négy fent felsorolt
megoldások . A DAPI folt volt is alkalmazzák , hogy a magok , hogy segítse számítógépes szoftver , hogy megtalálják a mag a képeken . a szoftver automatikusan összeszámlálása színezék mennyiségét a sejtmagban . Abban az esetben, ha a P- Jun, a mérések több mint száz sejteket tettek annak érdekében , hogy össze az összefoglaló táblázatot.
Eredmények:
P65/NF-kappaB
A képek festett sejtek p65 alegység az NF-KB alább láthatók. Ez vizuálisan nyilvánvaló, hogy a nincs toxikus válasz regisztrálva expozíció a sejtek Asea képest egyértelműen pozitív választ látható a jobb szélső pozitív kontroll.A p65 alegység marad a külső a sejtmagok a legbaloldalibb 3 kép, ami azt jelzi, hogy nem mérgező válasz nyilván a sejteket.
P-június
Mivel megerősítése az NF-kappaB eredmények a P-Jun adatok azt is mutatják, hogy a vizuális bizonyíték nincs jelentős
toxikus válasz nyilvántartások. Szükséges volt a P-Jun adatokat kell átlagolni több mint 100 sejtet
Ahhoz, hogy statisztikailag szignifikáns numerikus eredményeket. A kapott ábra világosan mutatja, hogy nincs toxicitás
létezik, az 5%-ASEA. Blood koncentráció szájon át adva, de soha nem fog a közelébe is
Következtetések
Közvetlen kitettséget a sejtek viszonylag nagy koncentrációban ASEA nem regisztrálja jelentős toxikus válasz mért NF-KB-és P-június sejtmagba. Ezen eredmények alapján, ASEA,orálisan beadott, nem kell nyilvánvaló toxikus válasz vagy gyulladás bármely kitett szövetekben.